干货!透析袋/透析膜的处理方法、使用方法及实验步骤
透析袋(别称:透析膜)通常是由 半透膜制成的袋状容器。在生物大分子的制备过程中,除去盐、少量 有机溶剂、生物 小分子杂质和浓缩样品时都要用到透析的技术。 市面上的透析袋分两种,透彻了解两者的区别,不花冤枉钱! 1、湿型包装:此款透析袋为即用型,不可煮,也不需要煮,只需用纯水彻底冲洗即可;一般1米。 2、 干型包装:此款透析袋为即用型,不可煮,也不需要煮,使用前用纯水浸泡漂洗;一般5米。 区别:就在于干型需要组预处理,而即用型可以直接清洗后使用。所以能用干型可以尽可能用干型的,虽然略微复杂一些 但是真的性价比超高! 一、即用湿型透析袋的处理和使用方法: 特别提示:湿型透析袋的储存液中含有0.05%叠氮钠,使用者务必配带手套操作! 1、储存条件: 透析膜浸泡在储存液中,封放置于 4-37 °C之间环境,有效期3年。 2、透析袋使用方法: ①把透析袋剪成适当长度(10cm-20 左右)的小段。 ②用去离子水浸泡 10 分钟左右,再用去离子水膜内冲洗3次。 ③不使用的透析膜放回储存液中,密封保存,接触透析膜过程中必须戴手套。 ④使用时,一端用透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。装完样品后,加样端用夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析(详见透析袋装置简图)。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。 二、即用干型透析袋的处理和使用方法: 1、储存条件: 干型透析膜表层涂有甘油保护层,封放置于 4-37 °C 之间环境,有效期5年,处理过的透析袋放置在透析袋储存液中,4-37 °C 之间环境有效期3年。 2、透析袋使用方法: ①把透析袋剪成适当长度( 10cm左右)的小段。 ②用 60℃ 去离子水中水浴 30 分钟-1小时,再用去离子水膜内冲洗 3 次。 ③使用时,一端用下沉透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。装完样品后,用上浮夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析(详见透析袋装置简图)。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。 使用步骤: a.把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的 100 倍。(例如:在一升透析液中透析 10 毫升的样品) b.裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度(约占总样品体积量的 20%)作为头部空间 c.把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹 3-5 毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋 d.由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹 e.把透析样品放在合适的透析缓冲液中 f.透析要根据具体的应用需求。通常情况下,允许过夜透析。在持续透析的过程中,至少要进行3次全部更换透析液。建议在(透析后)2-4小时,6-8 小时和 10-14 小时(第 2 天早晨)更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行 2 小时的透析。 使用注意事项: a. 透析袋不能在纯水中长期储存,会长菌,用1%苯甲酸钠溶液储存 b. 样品按推荐的单位长度容量加样,不可多加,样品浓度不可太大,否则容易导致膜涨破 c. 样品和透析液体积比一般是1:50~500 d. 对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换。 e. 透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。湿型透析袋可以承受的温度高达 37℃,干型透析袋可以承受的温度高达 60℃。 f. 湿型透析袋或干型透析袋一旦变潮湿,不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌。 本文来自丁香园 ,如有侵权请联系删除! |