掌握样本处理,开启成功实验之门
你是否曾在实验中遇到样本处理的难题?是否因为样本处理不当而导致实验失败?别担心,今天我们将为你揭开样本处理的神秘面纱,带你开启成功实验之门! 一、细胞样本
对于细胞量较多的样品,可离心分离后用中性甲醛固定,制作琼脂细胞块,然后按照石蜡切片操作流程进行。
孔板里的爬片取出后,用 PBS 洗涤 2 次,4%多聚甲醛 4℃固定 15 分钟,吹干表面液体后置于-20℃保存。若短期内进行实验,可在固定后于 4℃放置。根据研究目的,PBS 洗涤可选择不做,如 TUNEL 染色检测凋亡时。
常用的固定液有 95%酒精、酒精-冰醋酸液、乙醚-酒精液和 Carney’s 液等,其中 95%酒精较为常用。 二 组织样本 1石蜡切片 1.1 取材要求
1.2 固定要求
1.3 切片保存
2.1 取材要求 组织应立即置于超低温冰箱或液氮中保存。 2.2 固定要求 切片后应立即放入甲醇、95%酒精、丙酮、4%多聚甲醛等固定液中。 2.3 切片保存 固定好的切片自然风干后,可密封并存放在-80℃或-20℃,但应尽快用于后续实验。
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