长见识了!细胞培养之血清是否需要热灭活?
细胞培养时,血清是否需要热灭活取决于具体的实验需求和细胞类型。一般来说,热灭活血清有以下一些考虑因素: 1.去除潜在的污染物:热灭活可以破坏血清中的补体、支原体等潜在的有害物质,减少对细胞的影响。 2.减少免疫反应:血清中的某些成分可能引发免疫反应,热灭活可以降低这种可能性。 3.稳定性:热灭活后的血清在储存和使用过程中可能更稳定,不易发生变质。 然而,热灭活血清也可能带来一些不利影响: 1.损失活性物质:某些血清中的生长因子或其他有益成分可能在热灭活过程中被破坏,影响细胞的生长和功能。 2.改变血清的物理性质:热灭活可能导致血清的粘度、渗透压等发生变化,对细胞产生不利影响。 因此,在决定是否热灭活血清时,需要综合考虑这些因素。一些常见的情况如下: 1.对于大多数细胞系,不热灭活的血清通常是可以使用的,尤其是在细胞生长和增殖良好的情况下。 2.如果细胞对血清中的某些成分非常敏感,或者实验要求较高的纯度和稳定性,可能需要进行热灭活。 3.对于某些特殊的细胞类型或实验条件,可能需要根据既往经验或文献来确定是否热灭活血清。 4.在实验过程中,可以进行一些对照实验,比较热灭活和未热灭活血清对细胞的影响。 最终的决策应该基于对具体细胞系和实验需求的了解。此外,血清的质量和来源也非常重要,选择高质量的血清并进行适当的质量检测也是确保实验成功的关键。 如何进行热灭活? 以下是一般的操作步骤: 1.将血清置于 56℃的水浴中,轻轻搅拌,使血清均匀受热。 2.保持水浴温度在 56℃,加热时间一般为 30 分钟左右。具体的加热时间可以根据血清的量和实验要求进行适当调整。 3.加热结束后,将血清迅速转移到冰上或冷水浴中,使其快速冷却。这可以减少热激对血清成分的影响。 4.将处理后的血清用于细胞培养实验。 本文来自:细胞铲屎官公众号,如有侵权请联系删除! |