超滤分离法的主要应用
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超滤是一种膜分离技术,它的特点是使用不对称多孔膜,根据分子的大小来分离溶液中的大分子物质与小分子物质。超滤尤其适用于大分子溶液的浓缩,不同种类分子的纯化以及溶剂交换等。超滤法是一种温和的、非变性的物理分离方法,比其它分离方法具有更高的效率,更灵活的优点。
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超滤分离法的典型用途
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对蛋白质、酶、DNA、单克隆抗体、免疫球蛋白进行浓缩和脱盐
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药物、激素的分析
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从PCR扩增的DNA中去除引物
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去除标记的氨基酸和核苷酸
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HPLC样品制备
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样品的除蛋白
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从生物体液、发酵肉汤培养基中纯化抗生素、激素和药物
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从细胞悬液、裂解液中回收生物分子
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对蛋白质、酶、细胞、DNA、生物分子、抗体和免疫球蛋白进行
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常规意义的实验室浓缩和脱盐
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哺乳动物细胞的收集
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清洗细胞、纯化病毒、去除细胞碎片、除热源
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浓缩
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使用超滤来增加所需大分子溶质的浓度,即大分子被超滤膜截留而小分子和溶剂可自由通过,从而达到浓缩的目的
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梯度分离
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按分子大小梯度分离样品中的溶质分子时,超滤是一种经济有效的方法,适用于分离分子量相差10倍以上的分子组分。在超滤过程中,虽然截留的大分子被浓缩,但滤过的溶质分子仍保持初始的浓度
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脱盐/纯化
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脱盐即从大分子溶液中去除盐、非水性溶剂和小分子物质的过程。通过换缓冲液,可以最有效地去除溶液中的小分子物质。具体方法为:在溶液进行超滤的同时,不断向溶液中补充缓冲液,补充缓冲液的速度与溶液滤过速度相同,使体系始终保持恒定,这种方法又称透析超滤法
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