描述EasySelect™ 毕赤酵母表达试剂盒可最大限度发掘毕赤酵母菌株的增产潜力。EasySelect™ 毕赤酵母试剂盒包含毕赤酵母菌株染料、表达载体以及可促使毕赤酵母细胞转化的试剂。通过Zeocin™载体进行筛选，使得高拷贝的转化遍体。毕赤酵母表达系统的优势: • 使得>毕赤酵母细胞的培养如同大肠杆菌一样简单 • 获得优于其它微生物表达系统的细胞密度。 • 尽享蛋白表达、蛋白折叠和翻译后修饰所带来的优势。 • 易于从摇瓶发酵扩展到工业规模的发酵。 成熟的蛋白表达系统 过去三十余年，毕赤酵母 被全球各地的实验室和企业应用在众多生物(包括人在内)的蛋白制备(参考文献 1, 2, 3)。毕赤酵母 可像细菌(大肠杆菌) 或菌株 (酿酒酵母) 一样生长，且可提供超出此类系统的众多优势 (参考文献 4)。 毕赤酵母 可增殖到远远高于细菌或其他菌株的细胞密度。毕赤酵母 可以甲醇为单一碳源进行生长，这也使其工业批量生产的成本相对较为低廉。 AOX1 启动子的作用 EasySelect™ 毕赤酵母表达试剂盒采用来自 the 毕赤酵母 醇氧化酶 1 (AOX1) 基因的启动子来启动蛋白的制备过程。 毕赤酵母 以甲醇为单一碳源进行生长。 以甲醇为单一碳源生长时，AOX1 mRNA 最多可占mRNA重量的 5% ，而AOX1 酶最多可占细胞重量的30% (参考文献 5)。 EasySelect™ 毕赤酵母 表达系统包含pPICZ 和 pPICZα 载体。pPICZ 和 pPICZα 载体包含一个多克隆位点(MCS)，可在AOX1启动子的控制下插入您希望插入的基因。pPICZ 和 pPICZα 载体同时含有 c-Myc 标签，检测更为方便; 多组氨酸(6xHis) 标签亦使得您所需的蛋白的检测和纯化更为方便。 由于 毕赤酵母 会天然分泌几类蛋白，您可以通过pPICZα 载体内的细胞外信号序列迫使其将您所需的蛋白分泌到培养基中，从而简化下游纯化过程。 获得整合 Zeocin™ 抗体的高拷贝 EasySelect™ 毕赤酵母表达试剂盒采用Zeocin™ 抗体筛选的转化毕赤酵母细胞。 pPICZ 和 pPICZα 载体含有来自印度斯坦链异壁菌(Sh ble)来源的博莱霉素基因，可赋予Zeocin™ 抗体阻抗性。pPICZ 和 pPICZα 载体可稳定地植入到毕赤酵母基因组中。通过增加Zeocin™抗生素浓度，您可以轻松地筛选出具有高整合拷贝数和高蛋白含量的克隆。 EasySelect™ 毕赤酵母表达试剂盒含有以下组分: • 小剂量的毕赤酵母和大肠杆菌染料，用于启动培养过程。 • 制备可转化的毕赤酵母细胞的溶液。 • pPICZ 和 pPICZα 载体，用于将您准备的基因融合到AOX1 启动子中。 • 基因序列引物，用于确认基因已植入到pPICZ 载体中。 • Zeocin™ 抗体，用于筛选转化的毕赤酵母细胞。 仅限科学研究，不可用于人或动物的诊断或治疗。 |
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