描述中性PH的Thermo Scientific键断裂剂TCEP 溶液是一种稳定、无巯基的磷酸盐基0.5M TCEP组分溶液，可以作为一种10×储液，添加在SDS-PAGE上样缓冲液中来还原蛋白的二硫键。中性PH的Bond-Breaker 键断裂剂TCEP 溶液的特点： • 无气味—与DTT和β-ME不同，TCEP是无异味的，有助于创造更加健康的实验室环境 • 高效—5 到50 mM TCEP在数分钟内即可完全还原大多数多肽或蛋白的二硫键（与DTT等效） • 特异性—选择性的完全还原甚至最稳定水溶液中的烷基化二硫键 • 快速—在室温和pH5的条件下不到五分钟即可还原蛋白的二硫键 • 稳定—耐空气氧化；无挥发性，与蛋白的其它功能基团不反应 • 通用性—可在广泛pH范围、盐、去垢剂、温度条件下还原多肽和蛋白 • 兼容性—不含巯基，因此在多数应用中不必去除还原试剂（例如组氨酸标记蛋白纯化、马来酰亚胺共轭结合） 键断裂剂TCEP溶液是一种无气味、不含硫醇的强力还原剂，可广泛应用于蛋白及其他需要还原二硫键的研究过程。该产品可作为SDS-PAGE样品缓冲液中B-巯基乙醇或DTT的高效便捷替代物，其中性pH有助于获得清晰条带，可避免将蛋白暴露在TCEP·HCl的强酸性环境中，避免发生水解和糖基改性。 键断裂剂TCEP溶液使用注意事项： • 还原反应可在广泛pH (pH 4.0-9.0)和温度(5到95°C)范围内进行。 • 大多数蛋白无需变性剂即可高效还原。但是，加入胍·HCl等变性剂有助于将内部二硫键暴露在固化TCEP中。 • 不建议使用尿素作为变性剂，避免形成氰酸酯并与巯基反应。 • 防止金属接触TCEP溶液，否则会降低TCEP活性。 • 在还原过程中向样品缓冲液中加入5至20 mM EDTA有助于防止巯基被二价金属离子氧化，如Zn 2+、Cu 2+和Mg 2+等。 • 还原后样品应尽快使用，长时间放置后会重新生成二硫化物。 |
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