一般描述
不含EDTA的cOmplete蛋白酶抑制剂片剂可抑制广泛的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。与其他cOmplete片剂相比,它们不含EDTA,可保持金属依赖性蛋白质的稳定性和功能不受影响。利用IMAC(固相金属亲和色谱)进行的多聚His标签融合蛋白亲和纯化也得到了简化(无需透析)。
由于优化了片剂的成分,它们对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有出色的抑制作用,并且非常适合保护从动物组织、植物、酵母和细菌中分离的蛋白质。不含EDTA的cOmplete片剂同时含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制剂。金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。 不含EDTA的cOmplete片剂与cOmplete片剂相同,唯一的区别是不包含EDTA或其他螯合剂(例如 EGTA)。 特异性
抑制丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶。不抑制金属蛋白酶。
应用
不含EDTA的cOmplete™蛋白酶抑制剂混合物已用作以下组分
不含EDTA的cOplete™蛋白酶抑制剂混合物已用作放射免疫沉淀测定(RIPA)裂解缓冲液成分,可重悬中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。它还用作HCT116大肠癌细胞重悬缓冲液成分。
cOmplete™, 不含EDTA可用于细菌、酵母、植物以及动物细胞提取物中的丝氨酸及半胱氨酸蛋白酶抑制。
不含EDTA的cOmplete片剂可用于抑制较大体积(高达50 ml)中的蛋白水解活性,其中EDTA可能干扰蛋白质稳定性(例如,含金属的蛋白质)或随后的检测。由于EDTA会对IMAC(固相金属亲和色谱)产生感染,cOmplete,不含EDTA更适合用于多聚His标签融合蛋白的分离过程。 如需在更小的体积(最高达10 ml)内对蛋白酶活性进行抑制,我们推荐使用不含EDTA的cOmplete Mini。 特点和优势
使用cOmplete蛋白酶抑制剂片剂可以保护蛋白质以免被广泛的蛋白酶降解。在短短几分钟内,不受抑制的蛋白酶水解活性即可降解您花费数天分离的蛋白质。这些方便的水溶性片剂各自含有蛋白酶抑制剂的混合物,能抑制大多数细胞类型(包括动物、植物、酵母和细菌)的蛋白酶水解活性。不需要称重或测量就能确保一致的结果。
组分
几种具有广泛抑制特异性的蛋白酶抑制剂专有混合物。
质量
用胰腺提取物进行性能测试。
外形
片剂保存在玻璃瓶中
制备说明
工作浓度:每50 ml提取液加入1片
工作溶液:制备工作溶液: 一片cOmplete无EDTA蛋白酶抑制剂片剂足以抑制50 ml提取溶液中的蛋白水解活性。当蛋白水解活性非常高时,应25ml提取缓冲液使用一片。片剂可以直接加到提取溶液中。也可制备储备溶液(25X浓度)。 制备储备溶液(25X浓度) 将一片不含EDTA的cOmplete片剂溶于2ml蒸馏水或2ml 100mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)。 储存条件(工作溶液):储备溶液可以在2至8℃下储存1至2周,或在-15至-25℃下储存至少12周。 重悬
溶于水性缓冲液,或直接添加到提取溶液中。也可采用2ml水或100mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)制备25×储备溶液。储备溶液在2至8℃下稳定保存1-2周或在-15至-25℃下稳定保存至少12周;在15至25℃下可以在含硫醇的溶液中使用。
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