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Thermo Scientific 转座子产品是基于噬菌体 Mu 的转座机制。该装置在噬菌体生命周期的溶解阶段通过在宿主基因组内重复转座来复制其基因组。这种 Mu 转座反应已经改进为使用单个酶（MuA 转座酶）催化的体外反应。使用该系统，一次体外反应可以生成超过一百万个转座子插入克隆。 Mutation Generation System（MGS 试剂盒）和Stop Generation System（STOP 试剂盒）专门设计用于蛋白质功能分析。使用这些新的转座子工具，能够在单个反应中创建饱和的突变蛋白文库，所需的手动操作时间少于其他所有方法。通过 PCR 或测序，可以定位转座子插入到每个突变克隆中的位置。借助 MGS 和 STOP 试剂盒，只需2至3天即可制备好数以千计的突变克隆用于表达研究。 MGS 试剂盒包含一整套试剂，可用于任何目标蛋白的转座子接头扫描突变。MGS Entranceposons 设计用于通过在整个相应目标基因中插入15 bp 框内接头来对目标蛋白结构进行细微改变。这种框内插入可以节省下游序列。 STOPKit Entranceposons 包含转座子序列末端部分的所有三个阅读框内的翻译终止密码子。通过添加不超过三个氨基酸，Stop Generation System的专有修饰能够从几乎任何目标蛋白中生成饱和的 C 末端删除文库。 特点： •高效—创建用于在单个反应中进行测序和蛋白质分析的饱和插入文库 • 快速—与常规方法相比，可缩短手动操作时间 • 随机—消除目标位点偏好或插入热点 应用 STOP 试剂盒可生成截短蛋白，用于以下物质的功能测定： •酶 • 受体 • 结构蛋白等。 MGS 试剂盒可在体外将随机生成的15个碱基对插入至任何靶标 DNA 中，用于： •快速构建任意蛋白质的框内五个氨基酸插入片段文库，以进行功能分析 • 快速随机诱变克隆启动子和其他调控 DNA 区域 • 将 NotI 限制性内切酶位点随机插入任意靶标 DNA 克隆 优势 MGS 试剂盒 •可通过单次反应生成成千上万的不同插入片段克隆 • 在所有 3 个阅读框内构建 5 氨基酸的随机插入片段 • 短框内插入片段；无终止密码子 • 灵活绘制目标突变图谱：通过 NotI 或 PCR 可轻松对突变作图 • 相对于接头分区突变更快速有效 • STOP 试剂盒 • 可通过单次反应，在两天内构建截短蛋白的饱和文库 • 包含所有三个阅读框内的翻译终止密码子 • 靶标 DNA 序列可为未知 • 相对于常规方法更快速有效 • 无需专用引物 |
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