Alexa Fluor™ 594 是一种亮红色染料。Alexa Fluor™ 594 染料用于成像和流式细胞分析中的稳定信号生成,具有水溶性和 pH 值不敏感性(pH 值 4 - pH 值 10)。除活性染料制剂外,我们还提供可与多种抗体、肽、蛋白、示踪剂和扩增底物偶联的 Alexa Fluor™ 594 染料,以优化细胞标记和检测(了解更多)。 Alexa Fluor™ 594 的 NHS 酯(或琥珀酰亚胺酯)是将该染料与蛋白或抗体偶联的较常用工具。NHS 酯可用于标记蛋白、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子的伯胺 (R-NH2)。所得 Alexa Fluor™ 偶联物将显示出比其他光谱相似荧光基团的偶联物更亮的荧光和更高的光稳定性。 关于该 AlexaFluor™ NHS 酯的详细信息: 荧光基团标记:Alexa Fluor™ 594 染料 反应性基团:NHS 酯 反应性:蛋白和配体、胺修饰的寡核苷酸上的伯胺 偶联物的 Ex/Em:590/617 nm 消光系数:92,000 cm-1M-1 光谱相似染料:Texas Red、Bodipy-TR 分子量:819.8 典型偶联反应 您可以将胺反应性试剂与几乎任何蛋白或肽偶联(提供的方案针对 IgG 抗体进行了优化)。您可以针对任何量的蛋白进行反应,但为了获得较佳结果,蛋白的浓度应至少为 2 mg/mL。我们建议使用三种不同摩尔比的反应性试剂对蛋白进行三种不同程度的标记。 Alexa Fluor™ NHS 酯通常溶于高质量的无水二甲基甲酰胺 (DMF) 或二甲亚砜 (DMSO) (D12345) 中,并在 0.1 – 0.2 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 值 8.3)中于室温下进行反应,持续 1 小时。由于末端胺的 pKa 低于赖氨酸 ε -氨基基团的 pKa,您可以使用接近中性 pH 值的缓冲液对胺末端进行更具选择性的标记。 偶联物纯化 通常使用凝胶过滤柱(如 Sephadex™ G-25、BioGel™ P-30或等同柱)将标记抗体与游离 Alexa Fluor™ 染料分离。对于更大或更小的蛋白,选择具有适当截留分子量的凝胶过滤介质或通过透析纯化。我们提供了几种优化的纯化试剂盒,用于不同量抗体偶联物: 0.5-1 mg 用抗体偶联物纯化试剂盒 (A33086) 20-50µg 用抗体偶联物纯化试剂盒 (A33087) 50-100µg 用抗体偶联物纯化试剂盒 (A33088) 了解更多关于蛋白和抗体标记的信息 我们提供多种可供选择的 Molecular Probes™ 抗体和蛋白标记试剂盒,以适应您的起始材料和实验设置。参见我们的抗体标记试剂盒或使用我们的标记化学选择工具进行其他选择。要了解更多关于标记试剂盒的信息,请阅读 用于标记蛋白质和核酸的试剂盒—部分 1.2 在 Molecular Probes™ 手册中. 我们将为您制作定制的共轭物 如果您在我们的在线目录中找不到您想要的东西,我们将为您准备定制的抗体或蛋白质偶联物。我们的 风俗共轭服务 是高效和保密的,我们坚持我们的工作质量。我们通过了 ISO 9001:2000 认证。 |
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