Dynabeads™ Oligo(dT)25 mRNA 分离珠专门靶向和捕获几乎所有粗样品中的 mRNA 分子,当所需的含信息核酸为 mRNA 时,无需纯化总 RNA。由于 mRNA 仅占细胞总 RNA 的约 1–5%,因此总 RNA 分离并不是最有效的 mRNA 分离方法。其他设计用于纯化总 RNA 的技术可获得 ∼80% 的核糖体 RNA,并迫使 mRNA 在膜结合方面与核糖体 RNA、转运 RNA、微小 RNA、小核仁 RNA 和小胞浆 RNA 竞争。Dynabeads™ Oligo(dT)25 珠的优势: •通过快速且温和的程序可获得完整 mRNA 纯品 • 极纯 mRNA 分离,cDNA 合成上游的极佳选择 • 极其灵敏的 mRNA 分离可通过超小量起始样品进行 cDNA 合成和 cDNA 文库构建(可通过单细胞实现 cDNA 文库构建) 珠的工作原理 寡核苷酸(dT)25-包被 Dynabeads™ 特异性靶向并捕获来自极其广泛的粗起始样品的 mRNA 转录组。核糖体 RNA、DNA、蛋白和小 RNA 分子(如转运 RNA、微小 RNA 和小核仁 RNA)不会与珠结合且会被丢弃。仅捕获多腺苷酸化 RNA 物质 (mRNA)。分离出的 mRNA 是纯品,无需进行核糖体 RNA 消减或提取后 DNase 处理。此无柱系统可确保极高转录组回收率: •在移动磁珠上实现物理 mRNA 捕获 • 快速且温和的磁性处理流程 • 在高速离心期间不会损失 mRNA • 在洗脱期间,mRNA 不会吸附在柱膜上 应用 mRNA 适用于所有下游分子应用,包括基因克隆、cDNA 合成、cDNA 文库构建、RT-PCR 定量 RT-PCR、RPA(核糖核酸酶保护试验)、消减杂交、引物延伸、SAGE、RACE 和其他。Dynabeads™ Oligo(dT)25 mRNA 分离珠是 cDNA 文库构建前的理想 mRNA 纯化方法。这些珠的使用确保了转录组的极高回收率和富集率。通过并入 mRNA 分离上游总 RNA 分离步骤的方法,这些珠可能会捕获更多的转录组。 Verastile 洗脱选项 可在低至 5 µL 的任何体积下进行洗脱。mRNA 洗脱是可选的,因为存在 Dynabeads™ 不会抑制下游程序中的酶反应。此外,可以直接在珠上进行 cDNA 合成以创建可重复使用的固相 cDNA 文库。 |
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