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SuperScript™ IV 逆转录酶 (RT) 是一种专有 MMLV 突变体，在 RT 反应中具有出色的稳健性和可靠性。SuperScript™ III 在抑制剂耐受性、合成性和反应速度等方面得到了很大提高，同时保留了前代酶的所有优点，包括较高的热稳定性、高效全长 cDNA 合成以及较低的 RNA 酶活性。SuperScript™ IV Rt 旨在在存在抑制剂下提供可靠、一致且快速的 cDNA 合成，前述抑制剂在很多样品中均存在且会导致其他当前可用的 RT 效率低下。 SuperScript™ IV RT 是 SuperScript™ 产品系列中所有 RT-PCR 和 qRT-PCR 应用的首选。尤其是当重现性和可靠性成为主要考虑事项，以及 RNA 样品中的抑制剂可能干扰 cDNA 合成，进而导致基因表达研究出现偏倚时，我们推荐使用这款产品。 SuperScript™ IV 逆转录酶的功能包括： •显著提高了对多种可能干扰 cDNA 合成的抑制剂的耐受性 • 可对多种样品进行稳健且具有特异性的 cDNA 合成 •较快的逆转录酶反应，可将孵育时间从 >50 分钟缩短至 10 分钟 •与 SuperScript™ III RT 相比，持续合成能力显著提高 来源 从表达 M-MLV pol 基因的大肠杆菌中纯化，经修饰可提高热稳定性和半衰期、持续合成能力、抑制剂耐受性并降低 RNase H 活性。 性能和质量检测 脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶及核糖核酸酶检测；cDNA 产物的得率和长度。 单位定义 一单位的 SuperScript™ IV RT 是指在 37°C 下使用 poly(A) oligo(dT)12-18 作为模板/引物，将 1 纳摩尔脱氧核糖核酸在 10 min 内掺入酸可沉淀材料所需要的酶量。 单位反应条件 50 mM Tris-HCl（pH 值 8.3）、4 mM MgCl2、10 mM DTT、50 mM KCl、0.5 mM dTTP、0.4 MBq/mL [3H]-dTTP、0.4 mM poly(A) oligo (dT)12-18 和酶，20 μL，37°C 下 10 min。 |
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