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CorrectASE™ 酶可去除由寡核苷酸合成错误引起的错配，从而使您的合成基因或片段中突变减少至原来的 1/3 – 1/10。通过将 CorrectASE™ 酶引入由您自己操作的基因合成工作流程，您可以实现： •减少您的合成基因或片段中的突变数量 • 通过仅筛选每个合成构建体的 2–4 个克隆而非 10-16 个克隆，从而减少了您的劳动时间 • 通过仅测序 2–4 个克隆而非测序 10–16 个合成基因，从而减少了您的成本 防止不需要的突变 在合成过程中，市售合成寡核苷酸具有较高的错误率，根据来源不同，每 300–1000 碱基中至少有一个错误。这些错误导致基因合成过程中出现移码（缺失和插入）和错配突变。用 CorrectASE™ 酶进行孵育可去除两种突变类型。 在进行寡核苷酸初始 PCR 组装后，引入使用 CorrectASE™ 酶进行的孵育步骤。对 PCR 产物进行变性和再退火将导致所有突变不可匹配。CorrectASE™ 酶与产生的错配结合，并使错误的 DNA 双链 3’ 产生缺口。酶的 3’ 至 5’ 核酸外切酶活性可消除错误。然后，使用校正聚合酶进行的最终 PCR 组装正确片段，从而增加使用正确序列分离克隆的可能性。根据得到的寡核苷酸质量，相较于工作流程中不包括校正步骤的 10–16 个克隆，仅需筛选 2–4 个克隆。在您的基因合成工作流程中加入 CorrectASE™ 酶可减少劳动时间和测序成本。 |
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