PCR Master Mix是包含Taq DNA聚合酶、dNTP以及PCR所需的除了DNA模板和引物以外的所有组分的2X浓缩溶液。由于减少了PCR设置所需的移液步骤,因此这种预混合制剂可以节省时间和减少污染。该混合试剂经过优化适用于有效而可重复的PCR。 产品特点 • 热稳定性—在95°C半衰期超过40分钟 • 扩增得到具有3’-dA 末端的PCR产物 • 提供两种缓冲液—10X Taq 含有KCL的10x Taq 缓冲液以及含有(NH4)2SO4的10x Taq 缓冲液。后者可在较宽范围的镁离子浓度下进行PCR并减少非特异性结合 • 能结合修饰核苷酸(例如:生物素标记的核苷酸、地高辛标记的核苷酸、荧光标记的核苷酸) 应用 • 常规PCR扩增,可扩增长达5 kb的DNA片段 • 高通量PCR • DNA 标记 包含 Taq DNA聚合酶(重组酶): • Taq DNA聚合酶 5 U/µL • 含有KCl的10X Taq 缓冲液 • 含有(NH4)2SO4的10X Taq 缓冲液 • 25 mM MgCl2 Taq DNA聚合酶(重组酶) LC: • Taq DNA 聚合酶 1 U/µL • 含有KCl的10X Taq 缓冲液 • 含有(NH4)2SO4的10X Taq 缓冲液 • 25 mM MgCl2 PCR预混液(2X): • Taq DNA 聚合酶 (0.05 U/µL),反应缓冲液,4 mM MgCl2以及各0.4 mM的dNTP • Nuclease-free水 注意事项 • 在PCR反应中, Taq聚合酶的出错率为单一核苷酸每个循环2.2 x 10-5个错配。与之相应的PCR反应准确度为4.5 x 104。准确度为错配率的倒数,这一参数体现了在单个错配事件发生前正确掺入的核苷酸的平均数目。 • 推荐在微阵列实验中使用不含去垢剂的10X Taq 缓冲液。 |
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