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碧云天生产的Rosetta(DE3)超级感受态细胞，英文名Rosetta(DE3) Super Competent Cells，是一种兼容真核生物6种稀有密码子进而实现重组真核蛋白表达的E. coli. Rosetta(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化，转化效率可以高达1×108cfu/μg DNA以上。 BL21是一种缺失内源性蛋白酶的大肠杆菌B菌株，它能有效避免重组表达蛋白的降解，广泛用于重组蛋白的表达。BL21(DE3)是被λ噬菌体DE3溶原化所得BL21衍生菌株。噬菌体DE3中的T7 RNA聚合酶受到lacUV5启动子控制。外源添加IPTG可以诱导BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的快速表达。T7 RNA聚合酶进而识别表达质粒载体上的的T7启动子，从而驱动重组蛋白的高效表达。因此BL21(DE3)菌株适合T7启动子驱动的重组蛋白诱导表达系统，比如常见的原核表达载体pET系列[1]。 Rosetta是在大肠杆菌BL21(DE3)基础上携带额外质粒所得衍生菌株。该质粒含有一个氯霉素抗性基因且可转录产生识别6种大肠杆菌的稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)的tRNA(这些tRNA是由它们天然的启动子驱动转录的)，因此Rosetta能够大大提高带有真核基因特异的稀有密码子的真核基因在大肠杆菌中的表达水平。 |
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